生物超弱發(fā)光采集系統(tǒng)及控制電路設計
摘要:生物超弱發(fā)光是生物系統(tǒng)在生命活動中的微弱發(fā)光現象。為了準確測量生物超弱發(fā)光,設計了一種用于生物超微弱發(fā)光的專用采集系統(tǒng)。系統(tǒng)的激發(fā)光源由單只大功率LED及光學系統(tǒng)構成,用壓控恒流源調整LED光照強度,通過電子快門精確控制光探測器的采集時間。測量金心吊蘭葉片的延遲發(fā)光結果表明,該系統(tǒng)測量精度高、重復性好。
關鍵詞:生物超弱發(fā)光;檢測;電子快門;壓控恒流源
O 引言
生物超弱發(fā)光是生物在生命活動過程中,輻射出的一種極其微弱的光子流,分為自發(fā)發(fā)光和延遲發(fā)光?,F在已經證明,它與生理代謝、光合作用和細胞分裂等等許多生命過程有關,并且對環(huán)境極為敏感。由于生物超弱發(fā)光蘊涵著豐富的生命信息,對其探測、分析與解讀是近十幾年來許多領域共同關心的課題。目前,已有不少研究,展示出其在揭示生命運轉機理以及農業(yè)、環(huán)境保護、醫(yī)療、食品衛(wèi)生等許多領域的應用潛力。由于生物超弱發(fā)光的強度較弱,且延遲發(fā)光衰減很快,其采集涉及到外來激發(fā)光的精確控制和微弱自體發(fā)光的實時測量,至今未見成熟的專用儀器,給研究帶來困難。鑒于此,本文開發(fā)了一類利用LED激發(fā)的生物超弱發(fā)光采集系統(tǒng),將LED激發(fā)光源、電子快門和光探測器整合在一起,通過單片機精確控制激發(fā)光源的光照時間與電子快門的開啟時間,使超弱發(fā)光尤其是延遲發(fā)光重復性測量的精度大大提高。
1 系統(tǒng)總體設計
該系統(tǒng)測量生物超弱發(fā)光的時域信息,采用單光子計數探測系統(tǒng)。主要包括激發(fā)光源、光源驅動電路、快門控制模塊、光探測器、數據采集與處理模塊、溫度控制模塊、暗室和計算機。系統(tǒng)總體結構如圖1所示。
樣品放在暗室中測量,隔絕外界光線影響。單只大功率超高亮度LED發(fā)出的光經過透鏡變換為平行光后,均勻照射到樣品上,中控模塊的單片機精確控制光強和輻照時間,溫度控制器保持樣品處于恒溫狀態(tài),快門驅動模塊按照預設程序控制電子快門的開閉,PMT進行生物發(fā)光的采集。
2 系統(tǒng)硬件設計
2.1 主控制電路
主控電路負責整個系統(tǒng)的正常運行,進行光照時間、光照強度和快門開閉的控制,結構框圖如圖2所示。主要包括微處理器、壓控電流源、光照時間控制、快門開關控制、LCD顯示、鍵盤接口和溫度控制模塊。
2.2 激發(fā)光源及其驅動電路
生物體的自發(fā)發(fā)光強度較穩(wěn)定,而延遲發(fā)光隨時間衰減很快,若將樣品用激發(fā)光源在暗室外照射后再拿進暗室測量,光照結束時間和測量開始時間的間隔很難控制,對實驗人員的技能要求較高。如果采用光源內置的方法,就能很好地解決這個問題。
系統(tǒng)采用單只大功率發(fā)光二極管(LED)作為激發(fā)光源,通過透鏡變換為平行光,保證樣品受光面的光強均勻分布。激發(fā)光源采用藍色LED,中心波長為467nm,帶寬為20nm,可以滿足一般實驗要求。也可以根據實驗的要求,將藍色LED更換為紅色、綠色和紫色等顏色的LED。
對LED光強的控制通過改變注入LED的電流大小來實現。為了保證實驗的精度,要保證LED驅動電流的恒流性,還要使得電路的電流大小可調,實現光源亮度的調節(jié)。因此,系統(tǒng)選用精密數控大功率電流源電路作為LED的驅動電路。電路的原理圖如圖3所示。
驅動電路主要由微處理器、液晶顯示與鍵盤輸入、數/模轉換與模/數轉換、壓控恒流源、差動放大電路等子模塊組成。
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