紫外可見分光光度計的技術(shù)指標(biāo)

二、影響光度準確度的主要因素

　　影響紫外可見分光光度計光度準確度的主要因素有以下幾個方面。

　　① 儀器的雜散光大小。

　?、?儀器的光度噪聲。

　?、?儀器的基線平直度。

　?、?儀器的光譜帶寬。

　?、?試樣的來源， 包括樣品的制備， 取樣的方法。

　?、?樣品的制備， 包括稱量、容量、溶劑、試劑、pH 值、時間、溫度等。

　?、?比色皿的性能等。

　　由此可知， 光度準確度或吸光度誤差A(yù)A （ 或ΔA） 是一個綜合性的技術(shù)指標(biāo)。要使用紫外可見分光光度計測得準確可靠的數(shù)據(jù)， 必須注重上述幾個方面的影響。否則， 不可能得到準確可靠的數(shù)據(jù)。特別應(yīng)該指出的是， 在給出吸光度誤差A(yù)A （或ΔA） ， 同時也給出透射比誤差TA （ 或ΔT） 時， 二者不能相互矛盾。

　　三、光度準確度的標(biāo)準測試方法

　　用于紫外可見分光光度計的光度準確度測試的材料， 應(yīng)該是純度高、穩(wěn)定性好的物質(zhì)。這些物質(zhì)中最主要的是鉻酸鉀（ K2 CrO4 ， 一般在堿性溶液中）、重鉻酸鉀（ K2 Cr2 O7 ， 一般在酸性溶液中） 、硝酸鉀、中性濾光片等。在堿性溶液中的鉻酸鉀是一種好材料， 但是因為含有堿性， 不能儲藏在普通玻璃容器中， 而需要儲藏在石英器皿中， 硝酸鉀本身不大穩(wěn)定。這些都限制了它們的使用。因此， 最好選擇易于純化又溶于酸性介質(zhì)中的物質(zhì)， 并且它們的稀溶液也是很穩(wěn)定的。因此， 重鉻酸鉀的0. 005mol/ L H2 SO4 溶液經(jīng)常被使用。

　　紫外可見分光光度計的光度準確度測試方法， 目前國內(nèi)外各生產(chǎn)廠家作法不一， 其主要原因是各國的國家標(biāo)準不同; 如美國國家標(biāo)準規(guī)定： “選擇合適的標(biāo)準參比材料， 在規(guī)定的波長處， 連續(xù)測10 個吸光度或透射比讀數(shù)， 取10個讀數(shù)的平均值， 實際吸光度或透射比與觀測值的平均值之差， 即為光度準確度”

　　美國NBS 規(guī)定， 在可見區(qū)用930 標(biāo)準片來測定光度準確度， 其標(biāo)準透射比值分別為10%、20%、30%的中性玻璃濾光片。規(guī)定還指出也可用NBS 的931 ， 它是一種溶液。而在紫外區(qū)內(nèi)， 則規(guī)定用NBS 的203 來測定光度準確度; 它是一種標(biāo)準透射比值分別為90%、30%、10% 熔融石英濾光片。此外，美國標(biāo)準還規(guī)定在紫外區(qū)內(nèi)， 用戶還可以自己配置高純度的化合物溶液來測定光度準確度。為此， 美國NBS 已發(fā)布了鉻酸鉀（K2 CrO4 ）、重鉻酸鉀（ K2 Cr2 O7 ）等標(biāo)準物質(zhì)可供選用。

　　我國在1992 年制訂的紫外可見分光光度計國家標(biāo)準中規(guī)定， 用重鉻酸鉀溶液來測試紫外區(qū)的光度準確度， 并明確指出了測試波長。在可見光區(qū)規(guī)定可用中性濾光片來檢測光度準確度， 其標(biāo)準片的透射比值分別為10%、20%、40%左右; 同時還規(guī)定在紫外可見整個區(qū)間， 都可用中性濾光片來檢測光度準確度， 其標(biāo)準片的透射比值也分別為10%、20%、40%左右。