離子色譜法測定牛奶中硫氰酸根方法

　　本檢測方法源自關于印發(fā)全國打擊違法添加非食用物質和濫用食品添加劑專項整治抽檢工作指導原則和方案的通知。

　　1 原理液態(tài)奶樣品沉淀蛋白、去除脂肪后，用離子色譜分析，電導檢測器檢測，外標法定量。

　　2 實驗部分2.1 試劑與材料2.1.1 試驗用水均為超純水2.1.2 乙腈（色譜純）

　　2.1.3 固相萃取小柱：OnGuard RP柱（2.5cc），或相當者（如C18），使用前依次用5 ml甲醇和10 ml水活化。

　　2.1.4 硫氰酸標準品：北京化工廠2.1.5 硫氰酸標準儲備液將硫氰酸標準品于80度烘箱內烘干2小時。準確稱取干燥后的硫氰化鉀1.6732g于1000ml容量瓶中，定容，混勻。即得1000ppm硫氰根標準儲備液。

　　2.1.6 硫氰酸標準中間液取硫氰酸標準儲備溶液 1 mL，置于100 mL容量瓶中，加水至刻度。此溶液含硫氰酸10 mg/L。

　　2.1.7 硫氰酸標準使用液移取0.1、0.2、0.5、1.0、2.0 mL硫氰酸標準中間液，用水定容于10 mL容量瓶中，濃度分別為0.1、0.2、0.5、1.0、2.0 mg/L。

　　2.2 儀器2.2.1 離子色譜儀：配備淋洗液發(fā)生器和電導檢測器；2.2.2 離心機：冷凍離心機。

　　2.3 樣品處理取4mL液體奶樣品，加入5mL乙腈沉淀蛋白，取上清液稀釋10倍，過RP柱（或經冷凍離心機）去除脂肪后上機。

　　2.4 離子色譜參考條件色譜柱：強親水性陰離子交換柱。IonPac AS16，4.0×250mm分析柱；IonPac AG16，4.0×50mm保護柱；或其他相當者。

　　流動相：KOH溶液，梯度淋洗。淋洗液由淋洗液在線發(fā)生器在線產生。

　　流速：1.0 mL/min；抑制器：ASRS-300型抑制器，4mm；抑制器抑制模式：外接水模式，抑制電流175mA；柱溫：30℃；進樣體積：100 μL。

　　3 結果計算X= c*9*10/4 …………………………（1）

　　式中：X——液態(tài)奶中硫氰酸的含量，單位為微克每毫升（μg/mL）；c——由標準曲線得到試樣溶液中硫氰酸的濃度，單位為微克每毫升（μg/mL）；9——液態(tài)奶的體積與乙腈體積之和，單位為毫升（mL）；4——液態(tài)奶的體積，單位為毫升（mL）；10——稀釋倍數；計算結果保留兩位有效數字。

　　4 精密度在重復性條件下，獲得的硫氰酸的兩次獨立測試結果的絕對差值不大于其算術平均值的5%。