近紅外光譜無(wú)創(chuàng)血糖檢測(cè)技術(shù)研究

　　糖尿病是一種內(nèi)分泌疾病。據(jù)報(bào)導(dǎo)，1997年全世界的糖尿病患者超過(guò)1.2億，到2010年將會(huì)增長(zhǎng)到2.2億以上?，F(xiàn)有對(duì)糖尿病較有效的治療手段是通過(guò)頻繁的檢測(cè)和胰島素注射來(lái)對(duì)血糖濃度進(jìn)行控制，從而減少或減輕由糖尿病導(dǎo)致的并發(fā)癥。

　　檢測(cè)血糖的方法主要是從體內(nèi)抽取血液通過(guò)生化檢測(cè)進(jìn)行分析，這屬于有創(chuàng)傷檢測(cè)，有創(chuàng)傷檢測(cè)給患者帶來(lái)的痛苦和不便。無(wú)創(chuàng)性血糖檢測(cè)已引起人們極大的關(guān)注，其意義是：（1）減少患者天天采血丈量的痛苦，進(jìn)步病人的生存質(zhì)量；（2）可進(jìn)步丈量次數(shù)，進(jìn)步血糖控制精確度，降低糖尿病并發(fā)癥發(fā)生的危險(xiǎn)；（3）降低每次丈量的本錢；（4）有可能形成含有檢測(cè)器和胰島素注射的閉環(huán)循環(huán)系統(tǒng)；（5）其丈量方法和原理可以推廣應(yīng)用到其它血液成分的檢測(cè)。在無(wú)創(chuàng)性血糖檢測(cè)研究中使用較多的是紅外光譜分析方法，通過(guò)對(duì)一束紅外光透過(guò)人體組織或者由其反射的光譜信號(hào)分析，確定組織內(nèi)葡萄糖的含量。目前較有效的光譜范圍是近紅外區(qū)（波長(zhǎng)為0.7um-2.5um）。

　　2紅外光譜檢測(cè)葡萄糖的原理和方法2.1水溶液中葡萄糖的近紅外吸收有機(jī)分子在近紅外光譜區(qū)的吸收主要是由于含氫基團(tuán)的分子振動(dòng)的倍頻與合頻吸收造成的[1]。有機(jī)分子的倍頻和合頻光譜能夠得到分子結(jié)構(gòu)、組成狀態(tài)的信息。有機(jī)物近紅外光譜，其特征性強(qiáng)，受分子內(nèi)外環(huán)境的影響小，但倍頻和合頻比基頻吸收帶寬得多，使得多組分樣品的近紅外光譜在不同組分的譜帶、同一組分中不同基團(tuán)的譜帶以及同一基團(tuán)不同形式的倍頻、合頻譜帶發(fā)生嚴(yán)重的重迭，從而使近紅外光譜的圖譜解析異常困難。在混合物中的化學(xué)組分，很難再分離出每種組分單一、無(wú)重疊的吸收光譜。在有強(qiáng)烈水的背景吸收情況下的生物混合液，常規(guī)方法很難丈量出低濃度物質(zhì)的含量。水是生物組織中的主要成分，不但有單一的紅外光譜，還有豐富的擴(kuò)展到近紅外區(qū)域的合頻和倍頻光譜。對(duì)水的紅外光譜分析可知，水在波長(zhǎng)為2.01um-2.5um的吸收較小，形成一個(gè)被稱為水傳輸窗的區(qū)域，所以水溶液物質(zhì)最好的分析波長(zhǎng)為2.0um-2.5um。水在3um以上其吸收率大于6AU/mm，很難丈量其它物質(zhì)。

　　2.2葡萄糖光譜的特異性在葡萄糖固體和葡萄糖溶液中所得的葡萄糖紅外吸收的基頻早已有報(bào)導(dǎo)。葡萄糖伸縮振動(dòng)能產(chǎn)生很強(qiáng)的合頻和倍頻吸收帶。葡萄糖水溶液的近紅外（2.0um-2.5um）光譜的丈量有吸收峰，葡萄糖的光譜是唯一的，但葡萄糖紅外區(qū)的合頻和倍頻光譜與水、脂肪和血紅蛋白電子吸收波段的幾個(gè)合頻和倍頻頻率相互重迭，即被其它成分的光譜所覆蓋。這是葡萄糖紅外光譜丈量的主要干擾。有機(jī)混合物對(duì)在近紅外區(qū)吸收譜帶的重迭以及漫反射光譜并不是各成分單獨(dú)存在時(shí)光譜的迭加。組織吸收對(duì)葡萄糖丈量也有影響，在手指這樣小的部位中近紅外光會(huì)削弱3-4個(gè)吸收單位，而5mmoL／L的葡萄糖濃度變化，光譜吸收的變化約10-5個(gè)吸收單位。組織光散射對(duì)葡萄糖丈量的影響也很大，組織散射的光強(qiáng)、定位誤差和身體各因素的影響是最主要的丈量誤差，這些都影響近紅外光譜學(xué)在血糖檢測(cè)中的應(yīng)用。

　　2.3光譜分析方法在紅外光譜分析時(shí)化學(xué)計(jì)量學(xué)方法是很有效的。化學(xué)計(jì)量學(xué)（Chemometrics）采用多元分析校正統(tǒng)計(jì)學(xué)方法與計(jì)算技術(shù)，解析化學(xué)丈量數(shù)據(jù)，由紅外光譜算出樣品各成分的含量。現(xiàn)在常用的多元分析校正方法中，進(jìn)行血糖檢測(cè)光譜分析效果較好的是偏最小二乘法（PLS），它將已知的葡萄糖濃度的光譜組，用主因子分析作定量計(jì)算的方法，對(duì)光譜矩陣進(jìn)行特征向量分析，然后使用多元線性回回，找出極小的光譜變化和分析物濃度之間的關(guān)系，消除與葡萄糖無(wú)關(guān)的光譜變數(shù)，得出校正光譜，通過(guò)校正光譜和樣品光譜的內(nèi)積（即點(diǎn)積）確定葡萄糖濃度。

　　3離體檢測(cè)和在體檢測(cè)的研究現(xiàn)狀3.1離體近紅外光譜混合葡萄糖溶液丈量JonathonT。Olesberg等使用80個(gè)含有葡萄糖、乳酸鹽、丙胺酸、抗壞血酸鹽、尿素和乙酸甘油酯樣品，丈量葡萄糖溶液在2.0um-2.5um波長(zhǎng)帶寬范圍內(nèi)的光譜，使用PLS校正光譜猜測(cè)溶液成分的濃度。結(jié)果表明，在0-35mm內(nèi)葡萄糖溶液的丈量猜測(cè)標(biāo)準(zhǔn)差為0.39mm，乳酸鹽為O.12mm，丙胺酸為0.53mm，抗壞血酸鹽為0.23mm，尿素為0.11mm，乙酸甘油酯為0.12mm，結(jié)果比較滿足。目前在成分從簡(jiǎn)單到復(fù)雜的水溶液中是可以猜測(cè)葡萄糖濃度的，但這些溶液相對(duì)血液或血漿還很簡(jiǎn)單，研究的成分最多是5種，所以還需進(jìn)一步研究更多成分的水溶液來(lái)模擬血漿或血液系統(tǒng)。

　　3.2血漿或全血近紅外光譜葡萄糖丈量Haahand從人群中獲得了4個(gè)不同的全血樣本，并將葡萄糖加進(jìn)其中。對(duì)每個(gè)個(gè)體，預(yù)備葡萄糖濃度從（3-743）mg/dl變化的20個(gè)血液樣本，然后在（1.5-2.3）um范圍內(nèi)收集每個(gè)樣本的近紅外光譜，再利用參照葡萄糖濃度，用這些光譜往創(chuàng)建PLS定標(biāo)模型。對(duì)所得光譜進(jìn)行研究之后表明，2.0um-2.3um含有很有多的葡萄糖信息。利用這段區(qū)域，所得交叉校驗(yàn)的SEP值為30.5mg/dL。這個(gè)誤差很大，但它可以通過(guò)增加定標(biāo)樣本的數(shù)目和控制掃描過(guò)程中樣本的溫度而有所減少。